LB-VSPI - лазерный сканирующий конфокальный микроскоп

Конфокальный лазерный микроскоп представляет собой метод высокоразрешающей визуализации, в котором в качестве источника света используется лазер, а детектирование осуществляется через точечную апертуру. В отличие от традиционной широкопольной флуоресцентной микроскопии, данная технология позволяет эффективно подавлять внефокальную засветку, обеспечивая высокую контрастность и возможность оптического сечения образца.

Принцип работы системы основан на конфокальном детектировании. Лазерный пучок проходит через волноводный мультиплексор и систему линз и зеркал, после чего направляется на четырёхполосный дихроичный светоделитель. Перед попаданием в объектив лазерный пучок проходит через сканирующую систему на основе гальванометрических зеркал. Благодаря высокоскоростному отклонению зеркал осуществляется точное управление положением лазерного пятна в X-Y плоскости. Сфокусированный до дифракционного предела пучок проецируется на образец, возбуждая флуоресценцию в фокальной плоскости.

Сигнальная флуоресценция собирается тем же объективом и по тому же оптическому пути возвращается к четырёхполосному дихроичному светоделителю, затем через линзы направляется в многомодовое волокно. После коллимации сигнал проходит через серию зеркал и дихроичных элементов. Важнейшим элементом системы является точечная апертура (пинхол): сигнал от фокальной плоскости фокусируется и проходит через отверстие, тогда как рассеянный свет от внефокальных плоскостей блокируется. Прошедший через пинхол сигнал дополнительно фильтруется для подавления остаточного лазерного излучения и фонового шума, после чего регистрируется лавинным фотодиодом (APD) и преобразуется в электрический сигнал.

Система LB-VSPI реализует данный принцип в конфигурациях, адаптированных под различные исследовательские задачи. Прибор доступен в трёх модификациях: VSPI-I (стандарт), VSPI-II (профессиональная) и VSPI-S (флагманская), отличающихся составом детекторов, наличием моторизации и расширенными возможностями обработки данных. Микроскоп может быть установлен как на прямом, так и на инвертированном корпусе, поддерживая методы визуализации в светлом поле, дифференциально-интерференционном контрасте (DIC) и флуоресценции.

Программное обеспечение системы включает более 25 функций постобработки: автоматическую панорамную стыковку, Z-секционную съёмку с 3D-реконструкцией, временные серии, многоканальную визуализацию с разрешением 8192×8192, а также интерактивные измерения, автоматическое распознавание клеток и количественный анализ флуоресценции. Опционально система может быть оснащена модулем сверхразрешения STED для достижения субдифракционного разрешения.